Occurrence of tick-borne pathogens in dogs in a coastal region of the state of Ceará, northeastern Brazil / Ocorrência de patógenos transmitidos por carrapatos em cães em uma região litorânea do estado do Ceará, nordeste do Brasil

Abstract The aim of this study was to determine the occurrence of tick-borne pathogens (Ehrlichia canis, Babesia vogeli, Hepatozoon spp. and Rickettsia spp.) in dogs in Vila de Jericoacoara, coastal region of Ceará, Brazil. Blood samples were collected from 153 animals and analyzed using molecular and serological methods. Sixty animals were found to be infected or exposed to at least one of the pathogens studied. Babesia vogeli was the most prevalent pathogen (15%), followed by E. canis (13.7%) and Hepatozoon spp. (11.8%), which was identified as Hepatozoon canis through sequencing. Twenty dogs (13%) were seroreactive to Rickettsia spp. Rhipicephalus sanguineus sensu lato was observed on 11.8% of the animals. There were associations between age (< 3 years old) and positivity for B. vogeli, and between habitation (stray dogs) and positivity for H. canis. There were also associations between anemia and infection with H. canis, and between leukopenia and exposure to Rickettsia spp. No association was detected between clinical alterations and infection with or exposure to the pathogens studied. The results confirmed that pathogens of veterinary importance are circulating in northeastern Brazil and showed that dogs are exposed to Rickettsia species with zoonotic potential, thus indicating a need for vector control measures.

Resumo O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de patógenos transmitidos por carrapatos (Ehrlichia canis, Babesia vogeli, Hepatozoon spp. e Rickettsia spp.) em cães na Vila de Jericoacoara, região costeira do Ceará, Brasil. Amostras de sangue foram coletadas de 153 animais e analisadas por métodos moleculares e sorológicos. Sessenta animais foram encontrados infectados ou expostos a pelo menos a um dos patógenos estudados. Babesia vogeli foi o patógeno mais prevalente (15%), seguido por E. canis (13,7%) e Hepatozoon spp. (11,8%), que foi identificado como Hepatozoon canis por sequenciamento. Vinte cães (13%) foram sororreativos à Rickettsia spp. Rhipicephalus sanguineus sensu lato foi observado em 11,8% dos animais. Houve associações entre idade (<3 anos) e positividade para B. vogeli, e entre habitação (cães de rua) e positividade para H. canis. Também houve associações entre anemia e infecção por H. canis, e entre leucopenia e exposição a Rickettsia spp. Não foi detectada associação entre alterações clínicas e infecção ou exposição aos patógenos estudados. Os resultados confirmaram que patógenos de importância veterinária estão circulando no nordeste do Brasil e mostraram que cães estão expostos a espécies de Rickettsia com potencial zoonótico, indicando a necessidade de medidas de controle do vetor.

Dioctophyme renale in wandering dogs in Pelotas, South of Brasil / Dioctophyme renale em cães errantes no município de Pelotas, Sul do Brasil

Abstract This study aimed to verify the occurrence of Dioctophyme renale in stray dogs in the city of Pelotas, in the state of Rio Grande do Sul, Brazil. The Laboratório Regional de Diagnóstico of the Universidade Federal de Pelotas received 146 wandering dogs for necropsy, sent by the City Hall of Pelotas from March 2012 to January 2020. Among the necropsied animals, seventeen dogs (11.64%) were diagnosed with dioctophymosis. Among these dogs, 11 were parasitized with one specimen in the right kidney, two dogs presented two specimens in the right kidney, and in other two dogs, the parasites were in the abdominal cavity. In one dog, two parasites were found in the left kidney; in another dog, both kidneys were parasitized, with two parasites in the right kidney and one in the left kidney. The data obtained in this study showed that the occurrence of D. renale in stray dogs in the city of Pelotas is high, and D. renale mainly parasitizes the right kidney.

Resumo Este trabalho possui como objetivo verificar a ocorrência de D. renale em cães errantes do município de Pelotas, no Rio Grande do Sul, Brasil. O Laboratório Regional de Diagnóstico da Universidade Federal de Pelotas recebeu 146 cães errantes para necropsia, encaminhados pela Prefeitura Municipal de Pelotas, no período de março de 2012 a janeiro de 2020. Dentre os cães necropsiados, 17 animais foram diagnosticados com dioctofimose, determinando uma ocorrência de 11,64%. Desses animais, onze estavam parasitados com um exemplar no rim direito, dois animais possuíam dois exemplares no rim direito. Em dois animais, os parasitas estavam na cavidade abdominal; em um animal havia, dois parasitas no rim esquerdo e noutro animal os dois rins estavam parasitados, tendo dois exemplares no rim direito e um exemplar no rim esquerdo. Os dados obtidos neste trabalho permitem concluir que é elevada a ocorrência de D. renale nos cães errantes do município de Pelotas, parasitando principalmente o rim direito.

Leukocytes and albumin in canine leishmaniasis

Canine Leishmaniasis (CanL) is a multisystemic and chronic inflammatory disease characterized by nonspecific clinical manifestations. In CanL, inflammatory cells and chemical mediators released in response to the parasite play a role in disease development and progression. Alterations on hematological parameters have been documented in CanL. These changes can also be assessed in relation to systemic inflammation caused by this disease. The circulating leukocyte counting, such as neutrophils, as well as the albumin level, are considered direct indicators of an inflammatory host environment. Several studies point to the use of biomarkers on the assistance in diagnosis and prognosis of several canine pathologies. The present study investigated the Neutrophils to Lymphocyte Ratio (NLR), Albumin to Globulin Ratio (AGR), and Neutrophils to Albumin Ratio (NAR) on systemic inflammatory response induced by Canine Leishmaniasis (CanL). For this purpose, adult dogs with confirmed diagnosis to CanL were divided into symptomatic (SD, n = 33) and asymptomatic (AD, n = 20) dogs for L. infantum and control dogs (CD, n = 20). Routine hematological and biochemical parameters were determined in blood samples using a veterinary automatic hematology and biochemical analyzers. Asymptomatic dogs (AD) had a higher number of white blood cells and neutrophils (16.48 ± 4.93; 13.41 ± 3.60, respectively) in relation to symptomatic dogs (SD) (13.54 ± 5.13; 10.42 ± 3.69, respectively) (P = 0.015 and P < 0.0001, respectively). Neutrophils to Lymphocyte Ratio (NLR) was higher in dogs with leishmaniasis (9.45 ± 3.76) than in healthy dogs (3.39 ± 1.19) (P < 0.0001). Serum total proteins (STP) and globulins increased in CanL, while albumin and AGR decreased in CanL, when compared to CD and references values to canine species. Neutrophils to Albumin Ratio (NAR) was higher in AD and SD (5.02 ± 1.14; 4.79 ± 1.07, respectively) when compared to CD (2.36 ± 0.55) (P < 0.0001). As reported in scientific researches, dogs with Leishmaniasis present alterations in circulating cell counts. Based on these data, we decided to expand this information using the NLR as a parameter in an attempt to better clarify the changes in these cells in CanL. We observed that NLR was increased on CanL in relation to healthy dogs, which could be a consequence of relative neutrophilia rather than lymphopenia. Neutrophils to Lymphocyte Ratio (NLR) is a biomarker that conveys information about inflammatory conditions. An elevated NLR can reflect an upregulated innate immune response, since neutrophils are effector cells of innate immunity and are involved in several acute and chronic inflammatory processes. Albumin is an acute phase protein that is considered an immune-inflammatory biomarker, which can be found reduced systemically in progressive inflammatory response. Serum total proteins (STP) and globulins were increased in CanL. These data are already well documented in CanL, which serum globulins are mainly associated with the increase of acute phase proteins, cytokines, and increase of specific antibodies to Leishmania infantum. Our results showed neutrophilia with hypoalbuminemia in CanL. So, in an attempt to assess the relationship of these two available markers, we used NAR calculation in order to evaluate the changes induced by CanL. In this study NAR was higher in CanL when compared to control dogs. Thus, our data indicate that NLR and NAR could be used as biomarkers in veterinary medical clinics in order to assess inflammatory profile in CanL, mainly in asymptomatic dogs. These parameters obtained from routine blood tests might be useful as cost-effective, easily accessible and helpful markers in order to distinguish the inflammatory response intensity in CanL.(AU)

Interspecies Phylogenetic Analysis of / 生物医学与环境科学（英文）

Objective@#This study aims to investigate the infection of @*Method@#Infection of the definitive human host and intermediate fish host by @*Results@#In 2016-2020, the average population infection rate of Hunan was 1.38%, while in Tongdao County the rate was up to 26.90%, and the highest fish infection rate was detected in Qiyang County (99.44% in the dorsal fin of @*Conclusion@#The systematically study of

Evidence of a sylvatic enzootic cycle of Leishmania infantum in the State of Amapá, Brazil

Abstract INTRODUCTION: Leishmania infantum was considered to be absent from Amapá until 2017 when canine infection was detected. However, there is a lack of knowledge about which reservoir species are involved in transmission in this region. METHODS: Between 2014 and 2016, 86 samples from wild mammals and 74 from domestic dogs were collected in Wajãpi Indigenous Territory and were tested for the presence of deoxyribonucleic acid (DNA) of Leishmania. RESULTS: The DNA of Le. infantum was detected in two rodent samples, Dasyprocta sp. and Proechimys cuvieri. CONCLUSIONS: This is the first evidence characterizing a sylvatic transmission cycle of Le. infantum in the State of Amapá.

Autochthonous canine visceral leishmaniasis cases occur in Paraná state since 2012: isolation and identification of Leishmania infantum / Leishmaniose visceral canina autóctone ocorre no estado do Paraná desde 2012: isolamento e identificação de Leishmania infantum

Abstract The aim of this study was to confirm the emergence of canine visceral leishmaniasis among dogs in Foz do Iguaçu. The disease was diagnosed through the isolation and molecular identification of Leishmania infantum. In the first sample collection stage (2012), three lymph node aspirates and 46 buffy coat samples were obtained mostly from the dogs that were seroreagents for leishmaniasis. In the second sample collection stage (2013), the buffy coat samples were collected from 376 dogs located close to Paraguay, Paraná river, center and peripheral parts of the city. The DNA from the six isolates, four from the first sampling stage (4/49) and two from the second sampling stage (2/376), was subjected to polymerase chain reaction using the K26F/R primers. The isolate was confirmed as L. infantum by sequencing. As none of the dogs had ever left the city, the isolates were confirmed as autochthonous. Further, the study confirmed the emergence of canine visceral leishmaniasis in Paraná through the identification of L. infantum among dogs in Foz do Iguaçu city. Hence, collaborative control measures should be designed and implemented by the public agencies and research institutions of Brazil, Argentina, and Paraguay to control the spread of visceral leishmaniasis.

Resumo O objetivo deste estudo foi confirmar a emergência da leishmaniose visceral canina em Foz do Iguaçu próximo à fronteira com a Argentina e ao Paraguai, por meio do isolamento e identificação molecular de Leishmania infantum. Em um primeiro estágio de coleta de animais (2012), três amostras de aspirados de linfonodos e 46 camadas leucocitárias foram obtidas de cães soropositivos para leishmaniose. Em um segundo estágio de coleta (2013), foram coletadas amostras de camada leucocitária de 376 cães de 20 localidades próximas à fronteira com o Paraguai, rio Paraná, centro e periferia da cidade. Seis isolados foram obtidos, quatro da primeira etapa (4/49) e dois da segunda etapa (2/376); estes isolados foram submetidos à amplificação com iniciadores K26F/R, e a análise de sua sequência confirmou a espécie como L. infantum. A autoctonia dos casos foi confirmada, pois 100% dos cães nunca haviam saído da cidade. O estudo confirma a emergência de leishmaniose visceral canina no Paraná com identificação de L. infantum em cães da cidade de Foz do Iguaçu. Assim, medidas de controle devem ser elaboradas e implementadas por órgãos públicos e instituições de pesquisa do Brasil, Argentina e Paraguai em parceria com o objetivo de controlar a disseminação de zoonoses e os casos humanos de LV.

Transmission of Leishmania infantum from cats to dogs / Transmissão de Leishmania infantum de gatos para cães

Abstract Leishmania infantum infection in cats has been reported in several countries, including Brazil. However, the transmission of visceral leishmaniasis (VL) from cats to another host has not been proven yet. Therefore, the aim of this study was to verify the possibility of L. infantum transmission from cats to dogs. In order to verify the possibility of VL transmission from the cat to the dog, xenodiagnosis was carried out in a VL-positive cat, using 55 female Lutzomyia longipalpis. Five days later, 40 insects were dissected to verify Leishmania infection. The remaining 15 females were fed in a healthy dog. The potential infection of the dog was verified through clinical, serological, parasitological examinations, and PCR, at three, six, and twelve months post-infection. All 55 L. longipalpis females became visibly engorged. Leishmania promastigotes were detected in 27.5% of the dissected insects. Leishmania infection in the dog was confirmed upon first evaluation. DNA sequencing of the parasite isolated from the cat confirmed L. infantum infection and showed 99% similarity with the L. infantum DNA sequences from the dogs. Through this study, it was possible to confirm the L. infantum experimental transmission from a domestic cat to a domestic dog through its biological vector L. longipalpis.

Resumo A infecção por Leishmania infantum em gatos tem sido relatada em vários países, incluindo o Brasil. No entanto, a transmissão da leishmaniose visceral (LV) de gatos para outro hospedeiro ainda não foi comprovada. Portanto, o objetivo deste estudo foi verificar a possibilidade de transmissão de L. infantum de gatos para cães. Para verificar a possibilidade de transmissão da LV do gato para o cão, foi realizado xenodiagnóstico em um gato com LV, utilizando-se 55 fêmeas de Lutzomyia longipalpis. Cinco dias depois, 40 insetos foram dissecados para verificar a infecção por Leishmania. As 15 fêmeas restantes foram alimentadas em um cão saudável. A possível infecção no cão foi verificada por meio de exames clínicos, sorológicos, parasitológicos e PCR, três, seis e doze meses após a infecção. Todas as 55 fêmeas de L. longipalpis ficaram visivelmente ingurgitadas. Promastigotas de Leishmania foram detectadas em 27,5% dos insetos dissecados. A infecção por Leishmania no cão foi confirmada na primeira avaliação. O sequenciamento do DNA do parasito isolado do gato confirmou a infecção por L. infantum e apresentou 99% de similaridade com sequências de DNA de L. infantum de cães. Através deste estudo, foi possível confirmar a transmissão experimental de L. infantum de um gato doméstico para um cão doméstico através do seu vetor biológico L. longipalpis.

Cumulative incidence and spatial distribution of dogs exposed to Toxoplasma gondii / Incidência cumulativa e distribuição espacial de cães expostos a Toxoplasma gondii

Abstract Toxoplasma gondii is one of the most important protozoa parasites worldwide. Although many seroprevalence studies have been performed in domestic and wild species, data on the cumulative incidence and the spatial distribution of T. gondii in animals are extremely scarce. In the present study, dogs from Botucatu municipality, São Paulo state, were followed for one year and their blood samples were collected on three moments: days 1, 180, and 360. The sera were submitted to the immunofluorescence antibody test (IFAT) to detect IgG antibodies to T. gondii. Age and sex were compared with IFAT results through statistical tests. Spatial analysis was used to detect clusters of seropositive dogs. Among the 350 dogs that were seronegative on day 1, 53 became seropositive in subsequent samplings; thus, cumulative incidence was 15.1% exposed dogs/year. Age and sex were not associated with serological results. The spatial analysis revealed that seropositive dogs were distributed in all the studied areas, with a significant cluster in a zone with poor sanitary conditions and low socioeconomic status. T. gondii is frequent and widely distributed in the urban area of Botucatu, and impoverished areas are possibly associated with high levels of environmental contamination by this parasite.

Resumo Toxoplasma gondii é um dos parasitas mais importantes mundialmente. Embora muitos estudos de soroprevalência tenham sido realizados em espécies domésticas e selvagens, dados sobre a incidência cumulativa e distribuição espacial de T. gondii em animais são extremamente escassos. No presente estudo, cães do município de Botucatu, estado de São Paulo, foram acompanhados por um ano, e suas amostras de sangue foram colhidas em três momentos: dias 1, 180 e 360. O soro foi submetido ao teste de imunofluorescência indireta (RIFI), para detectar anticorpos IgG para T. gondii. A idade e o sexo foram comparados com os resultados da RIFI por meio de testes estatísticos. Dos 350 cães soronegativos no dia, 1,53 se tornaram soropositivos nas amostragens subsequentes; portanto, a incidência cumulativa foi de 15,1% de cães expostos/ano. A idade e o sexo não tiveram associação com os resultados da sorologia. A análise espacial demonstrou que os cães soropositivos se distribuíram em todas as áreas compreendidas pelo estudo, com uma concentração significativa em uma região com condições sanitárias precárias e baixos níveis socioeconômicos. T. gondii é frequente e amplamente distribuído na área urbana de Botucatu, e regiões empobrecidas podem estar associadas a maiores níveis de contaminação ambiental por esse parasita.

High seroprevalence and associated factors for visceral leishmaniasis in dogs in a transmission area of Paraíba state, Northeastern Brazil / Alta soroprevalência e fatores associados da leishmaniose visceral canina em área de transmissão do Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil

Abstract Dogs have been implicated as main reservoirs for visceral leishmaniasis (VL) in urban areas. Therefore, studies on this species provide important data for public health. Thus, the objective of the present study was to ascertain the seroprevalence of canine VL (CVL) and the associated factors in the Brejo Paraibano microregion, northeastern Brazil. A total of 409 dogs were sampled from the eight municipalities of the microregion: Alagoa Grande, Alagoa Nova, Areia, Bananeiras, Borborema, Matinhas, Pilões and Serraria. The diagnosis of CVL was made using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA S7®), through which the prevalence observed was 29.3%. By robust Poisson regression analysis two factors were associated with seroprevalence: illiterate/incomplete elementary owner's education level (prevalence ratio = 1.57; 95% CI = 1.05-2.34; p-value = 0.027) and tick infestation (prevalence ratio = 1.82; 95% CI = 1.27-2.61; p-value = 0.001). It is concluded that the seroprevalence of CVL in the Brejo Paraibano microregion is high. The factors associated with seroprevalence indicated the importance to develop socioeducational actions on the population, and the finding that tick infestation was associated with seroprevalence shows that there is a need for investigation regarding the role of ticks in the epidemiology of CVL.

Resumo Os cães são apontados como principais reservatórios da leishmaniose visceral (LV) em áreas urbanas. Portanto, estudos com essa espécie fornecem dados importantes para a saúde pública. Assim, o objetivo do presente estudo foi determinar a soroprevalência da leishmaniose visceral canina (LVC) e os fatores associados na microrregião do Brejo Paraibano, Nordeste do Brasil. Foram amostrados 409 cães dos oito municípios da microrregião: Alagoa Grande, Alagoa Nova, Areia, Bananeiras, Borborema, Matinhas, Pilões e Serraria. O diagnóstico de LVC foi realizado com o ensaio imunoenzimático (kit ELISA S7®), no qual a prevalência observada foi de 29,3%. Pela análise de regressão de Poisson robusta, dois fatores foram associados à soroprevalência: proprietário analfabeto ou com ensino fundamental incompleto (razão de prevalência = 1,57; IC 95% = 1,05-2,34; p-valor = 0,027) e infestação de carrapatos (razão de prevalência = 1,82; IC 95% = 1,27-2,61; p-valor = 0,001). Conclui-se que a soroprevalência da LVC na microrregião Brejo Paraibano é alta. Os fatores associados à soroprevalência indicaram a importância do desenvolvimento de ações socioeducativas na população, e a associação da infestação de carrapatos com a soroprevalência mostra que há necessidade de investigação sobre o papel dos carrapatos na epidemiologia da LVC.

Serosurvey on rickettsiae of the spotted fever group and Rickettsia bellii among dogs in the state of Goiás, Brazil / Inquérito sorológico sobre riquétsias do grupo da febre maculosa e Rickettsia bellii entre cães no estado de Goiás, Brasil

Abstract The purpose of this study was to do a serological survey on three rickettsial species: Rickettsia rickettsii and Rickettsia parkeri, two species of the spotted fever group (SFG) that are considered to be great importance for public health; and Rickettsia bellii, a species of unknown pathogenicity that infects a variety of human-biting ticks. Serum samples from 273 dogs were tested using the indirect immunofluorescence assay (IFA). A total of 52 samples (19.04%) were seropositive for at least one of the three Rickettsia spp. antigens. Thirty-eight (73.07%), twelve (23.07%) and one (1.92%) of these dogs showed homologous reactions to R. bellii, R. rickettsii and R. parkeri, respectively. Our results showed that the seroprevalence of Rickettsia spp. was relatively low. However, the positive serological tests indicated that these dogs had become infected by these agents at some point in their lives. Lastly, our study adds to the previous knowledge on the epidemiology of rickettsiosis in the state of Goiás by doing the first record of detection of anti-R. rickettsii, R. parkeri and R. bellii antibodies by IFA among dogs, thus indicating that these agents may be circulating in the dog population analyzed.

Resumo O objetivo deste estudo foi realizar um levantamento sorológico para três espécies de rickettsias: Rickettsia rickettsii e Rickettsia parkeri, duas espécies do grupo da febre maculosa (GFM) consideradas de grande importância para a saúde pública; e Rickettsia bellii, uma espécie de patogenicidade desconhecida que infecta uma variedade de carrapatos que parasitam seres humanos. Amostras de soro de 273 cães foram testadas, usando-se a técnica de reação de imunofluorescência indireta (RIFI). O total de 52 amostras (19,04%) foram soropositivas para pelo menos um dos três antígenos de Rickettsia spp. Trinta e oito (73,07%), doze (23,07%) e um (1,92%) desses cães apresentaram reações homólogas à R. bellii, R. rickettsii e R. parkeri, respectivamente. Esses resultados demonstraram uma baixa soroprevalência para Rickettsia spp. No entanto, as amostras positivas indicam que esses cães foram infectados por esses agentes em algum momento de suas vidas. Por fim, este estudo contribui para o conhecimento sobre a epidemiologia das rickettsioses no estado de Goiás, realizando a primeira detecção de anticorpos anti-Rickettsia rickettsii, R. parkeri e R. bellii pela RIFI em cães, indicando que esses agentes podem estar circulando na população canina analisada.

Canine visceral leishmaniasis: perception, prevalence, and spatial distribution in municipality of Nossa Senhora do Livramento, Mato Grosso, Brazil / Leishmaniose visceral canina: percepção, prevalência e distribuição espacial em Nossa Senhora do Livramento, Mato Grosso, Brazil

Abstract The midwest region of Brazil has witnessed an increase in the number of cases of human (HVL) and canine visceral leishmaniasis (CVL). The aim of the present study was to evaluate the population's perception of these diseases, factors associated with CVL, its spatial distribution, and the prevalence of anti-Leishmania spp. in 385 dogs, determined using a commercially available immunochromatographic rapid test and confirmed using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Of the 385 samples, 54 were positive for CVL and confirmed by ELISA, corresponding to a prevalence of 14%. Knowledge of signs of CVL by tutors (p = 0.038); previous occurrence of CVL in the vicinity (p = 0.022); symptomatic dog(s) (p = 0.014), splenomegaly (p = 0.055), and ear ulcer(s) (p = 0.059) were significantly associated with CVL. The results revealed a significant prevalence of CVL spatially distributed in rural and urban contexts. The association between environmentally related variables and perception and the occurrence of CVL underscores the importance of implementing control and prevention strategies primarily focused on environmental management and health education activities.

Resumo No Brasil, a região Centro-Oeste tem apresentado aumento no número de casos de leishmaniose visceral humana (LVH) e canina (LVC). Com isso, o objetivo deste estudo foi avaliar a percepção da população em relação à doença, aos fatores associados a LVC, à distribuição espacial e à prevalência de anticorpos anti-Leishmania spp. em 385 cães, a partir do teste rápido imunocromatográfico e ensaio imunoenzimático (ELISA). Das 385 amostras, 54 foram reagentes para LVC e confirmadas no ELISA, correspondendo a prevalência de 14%. O conhecimento dos sinais da LVC pelos tutores (p = 0,038), a ocorrência prévia da LVC na vizinhança (p = 0,022), o cão sintomático (p = 0,014), esplenomegalia (p = 0,055) e apresentar úlcera em ponta de orelha (p = 0,059) foram significativamente associados à LVC. Os resultados demonstram expressiva prevalência de LVC, distribuídas espacialmente no contexto rural e urbano, e a associação de variáveis relacionadas ao ambiente e à percepção com a ocorrência da LVC ressaltam a importância da implementação de estratégias de controle e prevenção, focadas principalmente no manejo ambiental e em atividades de educação em saúde.

Molecular evaluation of piroplasms and hematological changes in canine blood stored in a clinical laboratory in Niterói, Rio de Janeiro / Avaliação molecular de piroplasmídeos e alterações hematológicas em amostras de sangue de cães armazenadas em laboratório de análises clínicas de Niterói, Rio de Janeiro

Abstract Piroplasm species were analyzed by molecular tools in total 31 blood samples from positive dogs, previously checked by stained slides, stored until DNA extraction between 2016 to 2018 in the laboratory Clinical Analyzes in Niterói, Rio de Janeiro. The piroplasms were identified by PCR, targeting the 18S rRNA gene and sequencing. From the total number of samples only 24 (77.4%) were positive and show adequate nucleotide sequences for interpretation with identity between 93%-100% with Babesia vogeli in compared to the sequences isolated of infected dogs from other states in Brazil deposited on GenBank. Most of dogs infected with B. vogeli had anemia (62.5%) and thrombocytopenia (95.8%). The findings of this study are compatible with previous reports in the literature and highlight B. vogeli as the most incriminated species in canine piroplasmosis in Brazil, and thrombocytopenia the hematological alteration most frequently identified in this infection. It is important to note that this is the first study involving the molecular characterization of piroplasms in the metropolitan region of Rio de Janeiro, based on PCR followed by sequencing.

Resumo Espécies de piroplasmídeos foram analisadas por meio de métodos moleculares, em 31 amostras de sangue de cães, previamente verificadas em lâminas coradas, estocadas até a extração de DNA entre 2016 a 2018 em laboratório de Análises Clínicas, em Niterói, Rio de Janeiro. Os piroplasmídeos foram identificados pela PCR, utilizando-se como alvo o gene 18S RNAr e, posteriormente, o sequenciamento. Do total de amostras analisadas, somente 24 (77,4%) foram positivas e apresentaram sequências nucleotídicas adequadas para interpretação com identidade variando entre 93% a 100% com B. vogeli, em comparação com as sequências isoladas de cães infectados de outros estados do Brasil, depositadas no GenBank. A maioria das amostras de sangue dos cães detectados com B. vogeli apresentaram, no hemograma, anemia (62,5%) e trombocitopenia (95,8%). Os resultados detectados neste estudo estão compatíveis com o evidenciado na literatura, pois B. vogeli tem sido a espécie mais relatada nas infecções caninas no Brasil, sendo a trombocitopenia a alteração hematológica mais evidenciada nas amostras analisadas. É importante ressaltar que este é o primeiro estudo envolvendo análise molecular e caracterização de piroplasmídeos, em amostras de sangue de cães da região metropolitana do Rio de Janeiro, utilizando-se a PCR associada ao sequenciamento.

Larva migrans in Votuporanga, São Paulo, Brazil: Where does the danger hide? / Larva migrans em Votuporanga, SP, Brazil: Onde se esconde o perigo?

Abstract Soil samples collected near municipal schools (public/EMEI and private/EPEI schools), clubs (CLB), public squares (PS) and residential condominiums (CND) and samples of animal faeces from the Zoonosis Control Centre (CCZ) of the municipality of Votuporanga/SP were analysed using the Baermann method for the detection of zoonotic helminth larvae. The prevalence rates of the nematode genera identified were determined, and the results were compared using Fisher's exact and chi-square frequency tests. Information about cases of larvae migrans in the population were collected from the Family Health Units and the private health plans. All sites were positive for Ancylostoma spp. and, with the exception of EPEIs and dog faeces, for Strongyloides spp. The prevalence of Ancylostoma spp. was 87.5% for CND samples, 74.29% for EMIEs, 63.64% for CLB, 61.76% for PS and 64.29% for dog's and 42.86% for cats at CCZ. The prevalence of Strongyloides spp. ranged from 14.29% (cats/CCZ) to 41.18% (PS). Cases of cutaneous larva migrans were reported during interviews. Thus, from the public health perspective, the risk of individuals that frequent recreational areas in the municipality, especially children, to be infected by helminth larvae is noteworthy, indicating the need to develop policies aimed at controlling this important zoonosis.

Resumo Amostras de solo colhidas em escolas municipais (ensino público/EMEI e privado/EPEI), clubes (CLB), praças públicas (PP), condomínios residenciais (CND) e de fezes de animais do Centro de Controle de Zoonoses (CCZ) do município de Votuporanga/SP, foram submetidas ao método Baermann para detecção de larvas de helmintos zoonóticos. Foram determinadas as taxas de prevalência dos nematódeos identificados, e os resultados confrontados pelos testes Exato de Fisher e Qui-quadrado. Atendimentos de casos de larvas migrans na população foram levantados em entrevistas realizadas em Unidades de Saúde da Família e em planos de saúde privados. Todos os locais apresentaram positividade para Ancylostoma spp. e, com exceção de EPEIs e de fezes caninas, para Strongyloides spp. Prevalência de Ancylostoma spp. foi verificada em amostras de CNDs (87,50%), EMEIs (74,29%), CLBs (63,64%), PPs (61,76%) e em fezes de cães e gatos do CCZ (64,29% e 42,86%, respectivamente). As prevalências de Strongyloides spp. variaram de 14,29% (gatos/CCZ) a 41,18% (PP). Atendimentos de casos de larva migrans cutânea foram relatados nas entrevistas. Portanto, ressalta-se o risco de frequentadores de áreas de lazer do município, especialmente crianças, de adquirirem infecção por larvas de helmintos, indicando a necessidade da elaboração de propostas de políticas voltadas ao controle dessa importante zoonose.

Endoparasitic fauna of two South American foxes in Chile: Lycalopex culpaeus and Lycalopex griseus / Fauna endoparasitária de duas raposas da América do Sul no Chile: Lycalopex culpaeus e Lycalopex griseus

Abstract Native foxes face serious threats related to anthropic activities and the uncontrolled pets. However, the transmission of several pathogens such as parasites by domestic dogs is an important conservation issue with limited attention in Chile. The lack of a proper identification of the helminths of wild canids in the country, based mostly in coprological studies, limited our knowledge in potential interspecific transmission. Thus, the aim of the present survey was to identify the parasitic fauna of two native canids, the Andean fox (Lycalopex culpaeus) (n=49) and Chilla (Lycalopex griseus) (n=17), from several localities in Chile through a complete parasitological survey. Sixteen different species were identified, 9 of which are new host records for Andean fox and two for Chilla fox in South America, and three are recorded for first time in Chile. Also, five of them are of zoonotic concern and six are known to use domestic dogs as their principal hosts. These findings have implications for public health and the conservation of canids whose interspecific transmission of parasites with domestic dogs is confirmed through these findings. The need for an exhaustive surveillance of wild carnivores is emphasized considering these hosts as important sources of micro- and macroparasites.

Resumo As raposas nativas enfrentam sérias ameaças devido às atividades antrópicas e contato com animais de estimação sem controle. Entretanto, a transmissão de patógenos, tais como parasitas de cães domésticos, é uma questão importante na conservação das raposas que têm sido pouco abordadas no Chile. A falta de uma identificação adequada dos helmintos de canídeos silvestres no país, que se baseia principalmente, em estudos coprológicos, limita o conhecimento sobre uma potencial transmissão interespecífica de parasitas. Assim, o objetivo do presente estudo foi identificar a fauna parasitária em dois canídeos nativos: a raposa andina (Lycalopex culpaeus) (n = 49) e a raposa chilla (Lycalopex griseus) (n = 17), provenientes de várias localidades do Chile, por meio de um levantamento parasitológico completo. Foram identificadas 16 espécies de parasitas, nove correspondem a novos registros de hospedeiros para a raposa andina e dois para a raposa chilla na América do Sul. Três espécies de parasitas são registrados pela primeira vez no Chile, cinco são motivo de preocupação zoonótica e seis são conhecidos por usar cães domésticos como seus principais hospedeiros. Esses achados têm implicações em saúde pública e na conservação de canídeos, pois confirmam a transmissão interespecífica de parasitas desde cães domésticos. A necessidade de vigilância exaustiva dos carnívoros selvagens é enfatizada considerando-se esses hospedeiros como importantes fontes de micro e macroparasitas.

Prevalence of intestinal parasite infections in stray and farm dogs from Spain / Prevalência de infecções por parasitos intestinais em cães errantes e de fazenda na Espanha

Abstract Dogs play a potential role as reservoirs for zoonotic parasites, being especially problematic uncontrolled dog populations such as stray and farm dogs with access to populated areas. In order to investigate the prevalence of canine intestinal parasites in at-risk dog populations, we tested a total of 233 faecal samples shed by stray and dairy farm dogs from northern Spain. Telemann method was used to detect the presence of eggs and (oo)cysts of common dog intestinal parasites and Cryptosporidium was detected by PCR. One hundred and forty eight out of 233 samples (63.5%) were positive for at least one intestinal parasite, being Ancylostomidae (35.6%; 83/233) and Trichuris (35.2%; 82/233) the parasites most frequently identified. Cryptosporidium DNA was not detected in any of the faecal samples analysed. The overall prevalence was significantly higher in stray dogs than in farm dogs (72.5% vs 58.8%). Specifically, stray dogs had a significantly higher prevalence of Ancylostomatidae, Toxocara, Toxascaris and Taenidae. These dog populations are an important source of environmental contamination with intestinal parasite forms, which could be of significance to animal and human health.

Resumo Os cães desempenham um importante papel como reservatório de parasitos zoonóticos, sendo especialmente problemáticas as populações descontroladas, como a de cães errantes e de fazenda, com acesso às áreas povoadas. Para investigar a prevalência de parasitos intestinais em populações caninas de risco, foram analisadas 233 amostras fecais provenientes de cães de fazendas leiteiras e errantes do norte da Espanha. O método Telemann foi utilizado para detectar ovos, cistos e oocistos dos parasitos caninos mais comuns e para a detecção de Cryptosporidium foi utilizada a técnica da PCR. Cento e quarenta e oito de 233 amostras analisadas (63,5%) foram positivas para pelo menos um parasito intestinal, sendo Ancyostomatidae (35,6%; 83/233) e Trichuris sp. (35,2%; 82/233) os parasitos identificados com maior frequência. O DNA de Cryptosporidium sp. não foi detectado em nenhuma das amostras fecais analisadas. A prevalência geral foi significativamente maior em cães errantes do que em cães de fazenda (72,5% vs 58,8%). Especificamente, os cães errantes tiveram prevalência maior para Ancylostomatidae, Toxocara, Toxascaris e Taenidae. Essas populações de cães são importantes fontes de contaminação ambiental, pois eliminam formas de vida desses parasitos, que podem ter impacto na saúde animal e humana.

Detection of tick-borne rickettsial pathogens in naturally infected dogs and dog-associated ticks in Medellin, Colombia / Detecção de patógenos rickettsiais transmitidos por carrapatos em cães naturalmente infectados e carrapatos associados a cães em Medellin, Colômbia

Abstract Tick-borne rickettsial pathogens (TBRP) are important causes of infections in both dogs and humans. Dogs play an important role as a biological host for several tick species and can serve as sentinels for rickettsial infections. Our aim was to determine the presence of TBRP in dogs and in dog-associated ticks and their potential risk to human diseases in Medellin, Colombia. DNA for E. canis (16S rRNA and dsb) and A. platys (groEl) was detected in 17.6% (53/300) and 2.6% (8/300) of dogs, respectively. Antibodies against Ehrlichia spp. 82 (27.3%) and Anaplasma spp. 8 (2.6%) were detected in dogs. Antibody reactivity against both agents were found in 16 dogs (5.3%). Eight dogs showed antibody for Rickettsia spp. with titers that suggest 3 of them had a probable exposure to R. parkeri. Rhipicephalus sanguineus s.l. (178/193) was the main tick in dogs, followed by R. microplus (15/193). The minimum infection rates (MIR) in R. sanguineus were 11.8% for E. canis and 3.4% for A. platys. E. canis and A. platys are the main TBRP infecting dogs and ticks and R. sanguineus s.l. is likely involved in the transmission of both agents. Interestingly, we found serological evidence of exposure in dogs for spotted fever group rickettsiae.

Resumo As riquétsias transmitidas por carrapatos (RTC) são causas importantes de infecção em cães e humanos. Os cães exercem um papel essencial como hospedeiros biológicos para diversas espécies de carrapatos, assim como podem ser úteis como sentinelas de infecções por riquétsias. O intuito deste estudo foi determinar a presença de RTC em cães, assim como em seus carrapatos, para determinar o risco potencial de doença humana em Medellín, Colômbia. DNA de Ehrlichia canis (16S rRNA e dsb) e Anaplasma platys (groEl) foi detectado em 17,6% (53/300) e 2,6% (8/300) dos cães, respectivamente. Anticorpos contra Ehrlichia spp. (82; 27,3%) e Anaplasma spp. (8; 2,6%) foram detectados nos cães. Reatividade de anticorpos contra ambos patógenos (Ehrlichia e Anaplasma) foi detectada em 16 cães (5,3%). Oito animais apresentaram anticorpos contra Rickettsia spp., e 3 deles sugerem uma provável exposição a Rickettsia parkeri. Rhipicephalus sanguineus s.l. (178/193) foi a principal espécie de carrapatos, seguida de R. microplus (15/193). A taxa de infecção mínima em R. sanguineus foi 11,8% para E. canis e 3,4% para A. platys. E. canis e A. platys são as principais RTC que infectam cãese R. sanguineus s.l. provavelmente está envolvido na transmissão de ambos os agentes. É evidente, porém, a exposição sorológica dos cães a riquétsias do grupo da febre maculosa.

Molecular prevalence of trichomonad species from pet shop puppies and kittens in Japan / Molecular prevalência de espécies trichomonas em filhotes de cães e gatos de pet shop no Japão

Abstract Pentatrichomonas hominis and Tritrichomonas foetus (cat genotype) have been commonly identified as intestinal trichomonads in both dogs and cats. Although P. hominis is considered as non-pathogenic protozoa in many kinds of mammals, it has the potential for zoonotic transmission. T. foetus has been recognized as the emerging causative agent of diarrhea in cats without the risk of zoonotic transmission. As pet shops are the major source of young companion animals, the present study discusses the molecular prevalence of P. hominis and T. foetus from 544 pet shop puppies and 409 kittens. The results suggest that the prevalence of P. hominis (puppies: 7.0%; kittens: 0.5%) and T. foetus (puppies: 0%; kittens: 2.4%) in pet shop young animals are low. In addition, the infections of P. hominis and T. foetus are not always associated with the clinical signs (soft or diarrhea feces).

Resumo Pentatrichomonas hominis e Tritrichomonas foetus (genótipo de gato) têm sido comumente identificados como trichomonas intestinais em cães e gatos. Apesar de P. hominis ser considerado como protozoário não patogênico em muitos tipos de mamíferos, tem potencial para transmissão zoonótica. Enquanto o T. fetus foi reconhecido como o agente causador emergente de diarreia em gatos sem o risco de transmissão zoonótica. Devido às lojas de animais serem as principais fontes de filhotes de animais domésticos, o presente estudo discute a prevalência molecular e/ou o potencial zoonótico de P. hominis e T. foetus em 544 filhotes de cachorro e 409 gatos de "pet shop". Os resultados sugerem que a prevalência de P. hominis (cães: 7,0%; gatos: 0,5%) e T. foetus (cães: 0%; gatos: 2,4%) em animais jovens de "pet shop" é baixa. Além disso, as infecções de P. hominis e T. foetus nem sempre estão associadas aos sinais clínicos (fezes moles ou diarreia).

Report of rare case of intense parasitism by 34 specimens of Dioctophyme renale in a dog / Relato de caso raro de parasitismo intenso por 34 exemplares de Dioctophyme renale em um cão

Abstract Dioctophymosis is caused by Dioctophyme renale, a nematode that usually affects the right kidney of carnivores. The aim of this study was to report on a case of a dog with progressive weight loss and swollen abdomen that was diagnosed as presenting dioctophymosis. The patient underwent surgical treatment through which 34 nematodes were found, of which 18 were female and 16 were male, with a maximum length of 74 centimeters. The parasites were free in the abdominal cavity and inside the right kidney, and had caused peritonitis, free fluid, severe adherences between the abdominal organs and renal perforation. Parasitic diseases with a high number of specimens of this species are uncommon in dogs. The disease progresses with an inflammatory reaction and consequent formation of adherences and granulomatous tissue. This surrounds the eggs that were eliminated in the abdominal cavity by the free parasites. This disease occurs frequently in the city of Pelotas, Rio Grande do Sul, Brazil, where the patient of this report was living. To the best of authors' knowledge, this is the case with the largest number of specimens of D. renale removed from a single dog in vivo.

Resumo A dioctofimose é causada por Dioctophyme renale, um nematódeo que geralmente afeta o rim direito de carnívoros. Este trabalho objetivou relatar o caso de um cão, com perda de peso progressiva e abaulamento abdominal, diagnosticado com dioctofimose. O paciente foi submetido a tratamento cirúrgico, o que permitiu o achado de 34 nematódeos, sendo 18 fêmeas e 16 machos, com tamanho máximo de 74 centímetros. Os parasitos encontravam-se livres na cavidade abdominal e no interior do rim direito, causando peritonite, formação de líquido livre, intensas aderências entre os órgãos abdominais e uma perfuração renal. Parasitoses com alto número de exemplares dessa espécie são incomuns em cães. Cursam com reação inflamatória, com consequente formação de aderências e tecido granulomatoso, envolvendo os ovos eliminados na cavidade abdominal pelos parasitos livres. A doença é frequente na cidade de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brasil, área de origem da paciente afetada. De acordo com a pesquisa realizada, acredita-se que esse é o caso com o maior número de exemplares de D. renale removidos de um cão in vivo.

Detection molecular of Rangelia vitalii in dogs from Parana State, Southern Brazil / Detecção molecular de Rangelia vitalii em cães do Estado do Paraná, Sul do Brasil

Abstract Rangelia vitalii infects erythrocytes, leukocytes and endothelial cells of dogs. The present study aimed to report the molecular detection confirmed by sequencing of R. vitalii in the state of Paraná, as well as describe the clinical, hematological and biochemical alterations of the infected dogs. Three sick dogs from the metropolitan area of Curitiba, PR, Brazil, underwent a physical exam, and laboratory tests included hematology, biochemistry, polymerase chain reaction (PCR), and gene sequencing. Clinical signs included apathy, anorexia, and hemorrhage. Intra-erythrocytic and extracellular piroplasms were found on peripheral blood smears from all three dogs. Blood samples from these animals were positive for Babesia sp. by PCR targeting 18S rRNA. PCR products from all three dogs were sequenced, and BLAST analysis showed that the PCR-generated sequences were highly homologous with those of R. vitalii previously reported. Hematologic findings included severe anemia, shift of neutrophils to the regenerative left, and thrombocytopenia. Serum urea levels were increased in all three dogs, and direct bilirubin levels were elevated in one dog.

Resumo Rangelia vitalii infecta eritrócitos, leucócitos e células endoteliais de cães. O presente estudo objetivou relatar a detecção molecular confirmada por sequenciamento de R. vitalii no estado do Paraná e descrever as alterações clínicas, hematológicas e bioquímicas dos cães infectados. Três cães doentes da região metropolitana de Curitiba, PR, Brasil, foram submetidos a exame físico e exames laboratoriais que incluíram hematologia, bioquímica, reação em cadeia da polimerase (PCR) e sequenciamento genético. Os sinais clínicos incluíram apatia, anorexia e hemorragia. Piroplasmas intra-eritrocíticos e extracelulares foram encontrados em esfregaços de sangue periférico dos três cães. As amostras de sangue destes animais foram positivas para Babesia sp. pela PCR baseada no gene 18S rRNA. Os produtos de PCR dos três cães foram sequenciados e a análise de BLAST mostrou que as seqüências geradas por PCR eram altamente homólogas com as de R. vitalii previamente relatadas. Os achados hematológicos incluíram anemia grave, desvio de neutrófilos à esquerda regenerativo e trombocitopenia. Os níveis de uréia no soro aumentaram nos três cães, e os níveis de bilirrubina direta foram elevados em um cão.